کلون سازی، تعیین ترادف و بیان ژن core ویروس هپاتیت c جدا شده از یک بیمار ایرانی مبتلا به هپاتیت مزمن

نویسندگان

nasrin rastgoo

m.sc. in medical biotechnology, tarbiat modares university, tehran, iran. ali karami

ph.d. in biotechnology, associate professor, bagyatallah university, tehran, iran. farzaneh sabahi

ph.d. in virology, associate professor, tarbiat modares university, tehran, iran

چکیده

مقدمه: ویروس هپاتیت c یکی از مهمترین عوامل ایجادکننده هپاتیت حاد ومزمن، سیروز و سرطان کبد در سطح جهان محسوب می شود. به دلیل روند رو به رشد ابتلا به hcv در سطح دنیا تحقیقات گسترد ه ای در نقاط مختلف جهان برای افزایش کیفیت روشهای تشخیصی و تعیین ژنوتیپ ویروس در حال انجام است. روشها: در این تحقیق ناحیه ژنی مربوط به پروتئین نوکلئوکپسید ویروس (ژن core) که یک ناحیه بسیار حفاظت شده درطول ژنوم ویروس است، از سرم یک بیمار ایرانی با روش rt-pcr جدا شده و پس از کلون سازی در وکتور 18 puc با پرایمر های یونیورسال تعیین ترادف شد. به منظور تولید پروتئین نوترکیب coreژن تعیین ترادف شده در وکتور بیانی a 28 pet کلون شد و پلاسمید نوترکیب حاصل به باکتری (3 de) 21 bl منتقل گردید. نتایج و بحث: نتیجه تعیین ترادف نشان داد که ژن core جداشده از یک بیمار ایرانی 96 درصد شباهت با سویه a1 و 95 درصد شباهت با سویه b1 ویروس هپاتیت c دارد. این نتیجه با نتایج سایر تحقیقات انجام شده در این زمینه مطابقت دارد. وجود باند 5/23کیلودالتون در ژل sds-pageو تست وسترن بلات با آنتی بادیهای مونوکلونال بیان پروتئین core را اثبات نمود. با تولید انبوه این پروتئین، می توان از آن برای استفاده در کیتهای تشخیصی بهره جست.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

ساخت و ارزیابی یک سازه ی dna بیان کننده ی پروتئین core ویروس هپاتیت c متصل به آنتی ژن s ویروس هپاتیت b به عنوان یک کاندید واکسن

مقدمه: با وجود این که ویروس هپاتیت c (hepatitis c virus یا hcv) یکی از عوامل مهم ایجاد کننده ی بیماری های مزمن کبدی می باشد، هنوز واکسن مناسبی برای آن تهیه نشده است. هدف از این مطالعه، ساخت یک سازه ی بیان کننده ی توالی c‏ore (aa: 1-122)  ویروس هپاتیت c متصل به آنتی ژن s ویروس هپاتیت b (hbsag یا hepatitis b surface antigen) و تأیید بیان آن در سلول های یوکاریوتی بود. روش ها: در ابتدا توالی core ا...

متن کامل

بررسی ژنوتیپ ویروس هپاتیت C در بیماران همودیالیزی مبتلا به هپاتیت C در استان گیلان

زمینه: بیماران همودیالیزی در ریسک بالاتر ابتلا به عفونت هپاتیت (HCV) C می باشند. عفونت HCV یکی از عوامل افزایش دهنده موربیدیتی و مورتالیتی در بیماران همودیالیزی است. ژنوتیپ های مختلف HCV پاسخ های متفاوتی به درمان می دهند. هدف این مطالعه بررسی شیوع ژنوتیپ های HCV در بیماران همودیالیزی در استان گیلان می باشد.روش کار: تمامی بیماران مراجعه کننده به 11 مرکز همودیالیز استان طی سال 87 با روش نمونه گیر...

متن کامل

مطالعه بیان پروتئین core+1 ویروس هپاتیت C توسط روش میکروسکوپی هم کانون

سابقه و هدف: پروتئین جدیدی تحت عنوان پروتئینF یاcore+1  شناخته شده است که توسط ژنوم ویروس هپاتیت C (HCV) کد می‌شود. عملکرد این پروتئین هنوز مشخص نشده است، اما به‌نظر می‌رسد در سیکل زندگی و بیماری‌زایی ویروس قش مهمی را داشته باشد. در این مطالعه کلون کردن و بیان ژن HCV core+1 در سیستم یوکاریوتی مورد بررسی قرار گرفت تا نقش این پروتئین در مسیرهای سیگنالینگ سلولی و مقاومت ویروس به درمان برر...

متن کامل

بررسی اثر پروتئین core ویروس هپاتیت HCV) C) بر روی بیان miR-150

Background : Hepatitis C virus (HCV) is considered as one of the major pathogenic agents of chronic liver diseases. Previous studies have shown that HCV proteins can interaction with gene regulatory networks such as microRNAs. The aim of this study was to investigate the effect of HCV core protein on the expression of miR-150 in a cell culture model. Materials and Methods: Plasmids expressin...

متن کامل

مطالعه بیان پروتئین core+1 ویروس هپاتیت C توسط روش میکروسکوپی هم کانون

سابقه و هدف: پروتئین جدیدی تحت عنوان پروتئینF یاcore+1  شناخته شده است که توسط ژنوم ویروس هپاتیت C (HCV) کد می‌شود. عملکرد این پروتئین هنوز مشخص نشده است، اما به‌نظر می‌رسد در سیکل زندگی و بیماری‌زایی ویروس قش مهمی را داشته باشد. در این مطالعه کلون کردن و بیان ژن HCV core+1 در سیستم یوکاریوتی مورد بررسی قرار گرفت تا نقش این پروتئین در مسیرهای سیگنالینگ سلولی و مقاومت ویروس به درمان برر...

متن کامل

نقش پلی مورفیسم کدون 10 ژن TGF-β1در بیماران مبتلا به عفونت مزمن هپاتیت C

سابقه و هدف: فاکتور رشد (Transforming Growth Factor-Beta 1 (TGF-β دارای نقش مهاری در هموستاز پاسخ ایمنی سلولهای T و سلول های T تنظیمی است و عامل تنظیم کننده پاسخ ایمنی بر ضد عفونت های ویروسی می باشد. کدون شماره 10 این پروتئین در پپتید نشانه آن واقع شده و در فرایند ترشح سایتوکاین ایفای نقش می نماید. این مطالعه به منظور بررسی پلی مورفیسم لوسین- پرولین کدون 10 TGF-β در بیماران مبتلا به عفونت مزمن ...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
پژوهش های آسیب شناسی زیستی

جلد ۹، شماره Spring ۲۰۰۷، صفحات ۹-۱۸

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023